声明：本次操作基于我司最近正在使用的HT7700；
接下来，我们看看规范化拍摄Umibio是怎么操作的？
1、送样要求：样品尽可能浓，颗粒浓度1.0E+10；
2、拍摄规范：样品以茶托状（有明显凹陷的）球形，椭球形或扁圆形，尺寸在30-150nm，有双层膜结构的颗粒为目标进行拍摄；照片以轮廓清晰，分辨率高，焦距合适（既没有过焦的虚影，也没有欠焦的黑边），背景杂质少，明暗适宜，颗粒居中，整体美观为佳；
默认拍摄100nm一张，200nm三张，500nm一张；
注：铜网中样品焦距无法调清时以调试后的最佳结果拍摄，样品中无特征明显的颗粒或无颗粒时，拍摄500nm的样品颗粒物或制样“地形”三张；
1、制样用品：培养皿，滤纸，碳膜铜网，无尘纸；计时器， 镊子，10μL移液枪及枪头等；
1）滤纸铺在培养皿内，用镊子将通网正面朝上小心放置在滤纸上；
2）移液枪取10μL样液滴在铜网上，呈水滴状站立，计时2min，使样本颗粒渗透，2min后用针头将液滴挑开；
3）取10μL染液以同样方式滴在铜网上，染色1.5min，染色结束后用针头将液滴挑开，用无尘纸将多余染液吸掉。
2、 左上角“operation”下，打开“加速电压/灯丝设定”窗口和“CCD相机操作”窗口；
3、 点击“HV on”加速电压上升，点击“Filam on”灯丝电压上升；
1）将样品杆顺进样轨道平行线向外拔，至有阻力拔不动时顺时针右转小角度(约15°)，再次向外拔；
2）至有阻力拔不动时逆时针左转(约45°)至样品杆上定位销完全移至定位销孔，样品仓红灯亮起；
3）将样品仓放气按钮向下拨至“Air”一侧，放气后灯灭，向外拔出样品杆。
5.1将样品杆小心放在支架上，塑料把手在左，样品端在右；(样品杆银色不锈钢部分可以手碰，黄铜部分不可以用手触摸)
(1) 用小圆杆抵住样品杆前端小孔，按住往左推拉，另一只手用镊子夹住压片左端小角取出压片；
(3) 压片凹面朝上，圆洞对准样品杆上圆洞，两角抵住右端凹槽放在样品杆上；
(4) 用小圆杆抵住样品杆前端小孔，按住往左推拉，压片自然落下，松手后压片被抵住；
6.1将样品杆按照定位销与销孔对应的方向插入至有阻力，将样品仓排气按钮向上拨至EVAC一侧，红灯亮；
6.2等抽真空完成后，绿灯亮起，并伴随“滴---”的声音，紧接将样品杆小心顺时针右旋至有阻力时，微微逆时针左旋，再将样品杆完全送进样品仓，上样完成。
7、点击 “Beam on”：待左上角束流加至10μA左右时，可以开始调试参数寻找目标样品；
9、“BRIGHTNESS”键——调节亮度；移动轨迹球——调节视野；“MAGNIFICATION”键——调节放大倍数；
12.1通过调节放大倍数，视野亮度和轨迹球找到目标样品并将其移动到视野中央；
12.2调节“BRIGHTNESS”至亮度到-12，点击“RUN”, 进入放大模式；
15、 可以重新更换样品继续拍照，或取出样品结束拍照，结束后样品杆需放回样品仓内；
16、 数据上传：在电镜旁边的电脑上按保存位置找到自己拍摄的照片，双击快捷方式打开数据上传客户端，将文件夹拖到页面中，输入自己的账户，等待数据上传结束。
17.1依次点击“Filam off”，“HV on”，关掉拍照和电压灯丝窗口；
17.2数据传输电脑关闭后，将COL按钮按到“O”一侧，关闭仪器。
2、染色过深或过浅：染液：5%磷钨酸溶液，PH中，染色1.5min；
4、视野中的杂质是什么：大白圆球，大梭形，小黑圆球，不明颗粒。
