复旦大学发现外泌体miR-150是重症肌无力疾病潜在的生物标志物

复旦大学发现外泌体miR-150是重症肌无力疾病潜在的生物标志物

摘要：重症肌无力（MG）是一种由神经-肌肉接头处传递功能障碍所引起的自身免疫性疾病，临床主要表现为部分或全身骨骼肌无力和易疲劳，患病率为(77～150)/100万，年发病率为(4～11)/100万。近期，来自复旦大学华山医院赵重波、罗苏珊团队的研究：低剂量的利妥昔单抗（RTX）在乙酰胆碱受体(AChR)阳性难治性的重症肌无力患者治疗中有效，同时RTX可降低血清外泌体miR-150水平，结果表明外泌体miR-150是重症肌无力疾病潜在的生物标志物。

研究背景：

  重症肌无力（MG）是一种自身免疫性疾病，大多数患者通过长期的免疫抑制剂可以达到缓解的效果。然而，10％–20％的MG患者对常规治疗方法（包括乙酰胆碱酯酶抑制剂，糖皮质激素，常见的非甾体类免疫抑制剂和胸腺切除术）反应不佳。这些人被称为“难治”患者。难治性MG多发于胸腺瘤相关的AChR + MG患者，肌肉特异性酪氨酸激酶阳性（MuSK +）MG患者，特别是女性患者，发病年龄较小。

靶向B淋巴细胞膜蛋白CD20的单克隆抗体利妥昔单抗（RTX），在难治性MG患者表现较好。但是，其有效的治疗方案和免疫学机制仍在探讨中。当前，RTX治疗难治性MG的方案特点是高剂量、类似于治疗风湿病的给药模式。此外，RTX可能耗尽CD20⁺ T细胞，使这些机制复杂化。因此，其他机制可能有助于RTX在治疗该人群时产生效果。

临床问题：

在MG中，某些刺激可能导致一些miRNA（miR-150-5p和miR-146a-5p）异常表达，而这些miRNA可能异常调节免疫细胞中的某些基因。但是，尚未有研究确定RTX是否可以改变MG患者的miRNA表达。考虑到外泌体miRNA通常以生物标志物使用的循环形式，复旦大学华山医院团队开展了这项前瞻性，自律性和试验性的临床试验，以探讨低剂量RTX(600 mg/6个月)是否可以影响AChR阳性难治性MG患者的血清外泌体水平miR-150-5p和miR-146a-5p。

研究结果：

该研究发现，乙酰胆碱受体阳性的难治性重症肌无力患者（MG），在进行小剂量的利妥昔单抗（RTX）治疗后的第6个月，RTX降低了血清外泌体miR-150-5p的表达，降低了患者的三个临床指标（MGFA，MMT，ADL），降低了病人的泼尼松龙需求。此外，CD19 +和CD27 + B细胞减少，显示与miR-150-5p密切相关。总结下来，小剂量RTX对AChR阳性难治性MG治疗有效。此外，实验数据为miR-150-5p作为MG潜在的biomarker作用提供了依据。

结果展示：

图1.临床和6个月随访时的各项指标变化

说明：a-d: MGFA-QMG, MMT, ADL, 和 QOL-15，e-j: CD3+ T, CD4+ T, CD8+ T, CD19+ B, CD27+ B，k: Prednisolone，i-m: miR-150-5p和miR-146a-5p。

实验方法：

   本研究中使用宇玫博生物外泌体提取试剂盒（Umibio，UR52136）进行的血清外泌体的分离；在外泌体miRNA检测过程中，使用了双内参(hsa-miR-16-5p 和U6)进行了qPCR检测。

参考文献：

1，  Low-dose rituximab lowers serum Exosomal miR-150-5p in AChR-positive refractory myasthenia gravis patients,J Neuroimmunol. 2020 Nov 15;348:577383. doi: 10.1016/j.jneuroim.2020.577383. Epub 2020 Sep 15.

全文下载：

http://www.umibio.cn/filedownload/201564