无外泌体血清的制备

2019-10-08

 

各位老师为祖国母亲庆祝生日辛苦了,节后咱们继续聊聊外泌体。在外泌体研究中,非常多的实验都需要用到无外泌体血清,因为如果血清中含有外泌体的话,会干扰您的实验结果,审稿人也会质疑的。如果您手头有超速离心机的话,您其实是可以自己制备的,如果没有超速离心机,那您也可以找商业化公司买。下面小编就从外泌体之家上找了一个操作秘籍,供各位老师参考。

 

首先,就是基本的离心条件了,目前超离比较好的就是贝克曼或者日立的了,这两家超离在行业内算是翘楚了。其次就是离心参数了:120000 g,4℃,离心14h,离心结果如图:

 

不过这里也有一些注意事项小编需要提醒您:

1:离心后,血清外泌体会富集在管底和管壁;

 

2:吸取血清时,只吸取澄清部分的血清,并且远离上图中标记的区域;

3:吸取70-80%的澄清的血清;(注意:动作慢,动作轻)

4:其余的浑浊血清留作正常细胞的的营养物添加使用,避免浪费。

5:如果觉得纯度不够,再把离心后收集的血清做二次超速离心。

6:针对超速离心后的血清,必须进行粒径检测(离心前样品和离心后样品),该数据可以放到文章补充材料中,用来证明无血清外泌体制备成功。

 

小编知道各位老师都是非常希望自己上手试试的,在这里预祝各位制备成功,当然,如果您在制备中有任何问题,可以联系宇玫博技术支持高博,电话是18952455895(微信&手机同号)。此人有三大特点:每天工作18个小时,技术功底深厚,为人和蔼可亲。您的问题一定会在第一时间得到满意的答复!

 

最后,要感谢外泌体之家,素材来源:

1, 外泌体之家:http://www.exosome.com.cn/thread-1673-1-1.html