荧光素酶报告实验

2016-08-10

一、启动子活性研究

某些转录因子与其靶启动子中的特异序列结合,从而对基因的表达起抑制或增强的作用,荧光素酶报告基因实验(luciferase report assay)是检测这类转录因子和其靶启动子中的特异顺序结合的重要手段。

 

 

二、基因3’UTR区和microRNA结合实验

由于miRNA主要通过作用于靶基因的3’UTR起作用,可以将目的基因3’UTR区域构建至报告基因luciferase的后面, 通过比较过表达或者干扰miRNA后,报告基因表达的改变(监测荧光素酶的活性变化)可以定量反映miRNA对目的基因的抑制作用;结合定点基因突变等方法进一步确定miRNA与靶基因3’UTR的作用位点。


     应用案例:

     

参考文献:

     Downregulation of miRNA-200c links breast cancer stem cells with normal stem cells. Cell. 2009 Aug 7;138(3):592-603. doi: 10.1016/j.cell.2009.07.011. [download]

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